培养液最新娱乐体验_关于食品灭菌手段辐照的说法(2024年12月深度解析)
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碧云天Trizol RNA提取全攻略 细胞裂解与组织匀浆 贴壁细胞:吸尽培养液,每10平方厘米细胞加入1ml Trizol。六孔板每孔加1ml,12孔板每孔加0.5ml。晃动3-5下,再用枪吹打2-3下,确保全部裂解,然后吸至离心管中。 悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,每五百万至一千万动植物或酵母细胞,或一千万细菌,加入1ml Trizol。用枪吹打或适当vortex,确保全部裂解。某些酵母和细菌如裂解不充分,可用匀浆器匀浆,确保全部裂解。 组织:先将组织剪切成小块,放入普通玻璃匀浆器内。每50mg-80mg组织加入1ml Trizol,匀浆。对于RNA完整性要求比较高的情况,推荐先液氮冷冻组织块,然后在低温下用研钵研碎组织,随后再加入Trizol进行总RNA抽提。 去除不溶物 对于某些蛋白、多糖或脂含量很高的细胞或组织,Trizol裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物。需12,000g 4℃离心10分钟,然后吸取澄清的Trizol裂解产物至一新的离心管中。 室温放置 室温放置5分钟,使样品充分裂解。 氯仿萃取 每毫升 Trizol加入0.2ml氯仿,vortex混匀或猛烈晃动15秒,室温放置2-3分钟。 离心分离 12,000g 4℃离心15分钟,然后吸取含总RNA的上层无色水相至一新的离心管中,每毫升Trizol约可吸取0.5-0.55ml。 沉淀RNA 按每毫升最初的Trizol加入0.5ml异丙醇,颠倒数次混匀,室温沉淀10分钟。如果希望提取microRNA等小RNA,推荐-70℃沉淀过夜。 再次离心 12,000g 4℃离心10分钟,在管底可见RNA沉淀,弃上清。 洗涤RNA 每毫升最初的Trizol加入1ml 75%乙醇(DEPC水配制),vortex或颠倒混匀。7,500g 4℃离心5分钟,弃上清。再用离心机甩一下(>5,000rpm, 离心1秒),小心吸尽液体。 溶解RNA 待RNA略干后,加入20 DEPC水溶解,-70℃冻存。注意:切勿让RNA过分干燥,否则将极难溶解,且测出的A260/280值会低于1.6。
探索微小世界的奇妙细菌 在显微镜下,我们发现了一群可爱的微生物——小细菌 。它们在培养液中自由自在地游弋,仿佛在进行一场神秘的舞蹈。犊᤻细观察,我们发现这些小细菌中间竟然藏着一个个气泡,它们在光线的照射下显得格外漂亮,宛如夜空中的繁星点点。 쨿次观察让我们对微生物的世界有了更深的认识,也让我们对自然的奥秘更加敬畏。𘦈们用镜头捕捉下了这些美丽的瞬间,希望这些照片能带你一起走进这个充满奇妙的微生物世界。
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水培茉莉8步,轻松开花! 茉莉花在水培条件下也能盛开,以下是一些关键步骤和注意事项: 选择枝条 𑊠 选择一年生或一年以上的老枝条,这样更容易生根和开花。 消毒处理 枝条的切口和水培容器都需要进行消毒,以确保没有细菌和病毒。 调配培养液 可以使用冷开水和HB101调配培养液,有助于茉莉花的生长。 固定枝条 如果枝条不容易固定,可以使用扎带或铝线绑住,确保它们直立且不会晃动。 光照控制 ☀️ 茉莉花需要适量的光照,通常每天两三个小时的光照即可。即使在连续阴雨天,散光条件也能让它们正常开花。注意,水培容器的向阳面要遮光,避免阳光直射容器。 换水频率 𐊠 每隔3到5天换一次水,及时清理瓶壁上的青苔,保持水质清洁。 处理切口 ✂️ 如果发现泡在水里的枝条切口变黑,要及时切掉黑的部分,后期长根就会稳定下来。 温度控制 室内气温保持在25℃左右,茉莉花比较容易水培开花。环境尽量保持通风,避免过冷或过热。 通过这些步骤和注意事项,你可以轻松养殖出水培茉莉花,享受它们的美丽和芳香。
病毒灭活工艺全解析:仪器、方法与验证 ✨仪器与试药: 略 練与结果: 病毒培养:将 TEMV 接种在 BHK21 细胞上,VSV 和 SV40 接种在 Vero 细胞上,PRV 接种在 PK15 细胞上。37℃吸附 1 小时后,弃去培养皿中的培养液,加入适量新鲜培养液,在 37℃下培养。在光学显微镜下观测,待细胞病变出现 +++ 时,将含病毒的细胞冻融 3 次,分装后于 - 70℃冻存备用。 病毒测定方法:采用 96 孔细胞病变法,用 Karber 法计算 TCID₅₀。各指示病毒滴度均大于 6lgTCID₅₀/0.1ml。 病毒灭活工艺:酶解工艺分为两步。第一步,控制水浴温度为 58℃,pH(6.0Ɒ.5),缓慢搅拌下向样品中加入木瓜蛋白酶,在(58Ⱳ)℃保持 16 小时;第二步,调整温度至 45℃,用 3mol/L 氢氧化钠溶液调至 pH8.0,加入胰蛋白酶,在(45Ⱳ)℃保持 4 小时,期间保持 pH(8.0Ɒ.5)。 病毒灭活验证步骤: 取 3 批酶解处理前的 1 钠盐溶液各 36.6ml,分别加入指示病毒液 4.4ml,混匀后各取出 4ml,除菌过滤,作为零点对照样品。 剩余的样品 - 病毒混合液中分别加入 20000IU 木瓜蛋白酶,缓慢搅拌,在(58Ⱳ)℃保温 16 小时,分别在 8 和 16 小时各取样 2ml,除菌过滤,作为处理后样品(8、16h)。 上述取样后(16h)剩余的样品 - 病毒混合液用 3mol/L 氢氧化钠溶液调至 pH(8.0Ɒ.1),加入胰蛋白酶 67.5IU,缓慢搅拌,在(45Ⱳ)℃保温 4 小时,用 3mol/L 盐酸调至约 pH7.0,取出其中 2ml,除菌过滤,作为处理后样品(20b)。 通过 96 孔细胞病变法滴定 TCID₅₀,计算零点对照样品和处理后样品检测值之差。计算按 Karber 法。每批样品重复测定 2 次。
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